HoloMonitor M4采用全息顯微術(shù)（digital holographic microscopy），以激光為相干光源，利用干涉原理記錄樣品的相位和振幅信息完成對細胞的成像。因此無(wú)需處理細胞，減少人為干預，真正做到無(wú)標記無(wú)侵入的同時(shí)一并獲得單細胞和種群兩個(gè)層面的量化參數與高質(zhì)量的影像與數據。
Figure 1 HoloMonitor M4活細胞成像系統拍攝的細胞分裂過(guò)程
Figure 2HoloMonitor M4 活細胞成像系統拍攝的傷口愈合實(shí)驗
HoloMonitor M4的六大優(yōu)勢：
ü無(wú)損傷——無(wú)需標記或染色，無(wú)光毒性，還原記錄細胞真實(shí)的生長(cháng)狀態(tài)。
ü體積小——可在培養箱中長(cháng)期穩定運行，在正常生理狀態(tài)下開(kāi)展延時(shí)成像分析。
ü實(shí)時(shí)性——實(shí)時(shí)監測單個(gè)細胞，同時(shí)獲得種群數據并提供完整的細胞形態(tài)學(xué)參數定量。
ü多數據——可重新分析同一樣品或結果以獲得更多實(shí)驗數據。
ü應用廣——可用于細胞增殖，分化，遷徙，凋亡，毒理等方面的研究。
ü智能化——簡(jiǎn)潔實(shí)用的智能圖像分析軟件，自動(dòng)對獲得的圖像進(jìn)行高內涵定量分析。
Figure 3抑制ER-a后的乳腺癌細胞 MCF-7的細胞軌跡對比圖。 來(lái)源：Gao, Y., Wang, Z., Hao, Q. et al. Loss of ERα induces amoeboid-like migration of breast cancer cells by downregulating vinculin. Nat Commun 8, 14483 (2017).
相比于其他常見(jiàn)的細胞成像技術(shù)，HoloMonitor M4活細胞成像系統不需要對細胞進(jìn)行染色或標記，避免了對細胞的不必要傷害，因此細胞可以被重復利用與下游研究，提高了細胞的利用率，節省了時(shí)間，經(jīng)費以及珍貴的細胞。同時(shí)，實(shí)驗結果可以用HoloMonitor M4的其他應用重新分析來(lái)獲得新的數據。
HoloMonitor M4活細胞成像儀配備有功能強大的圖像分析軟件App suite，使用簡(jiǎn)單明了，包含了精確的圖像處理模塊，不僅能提供細胞的種群信息如數量、細胞融合度、運動(dòng)遷移距離等，也可以提供單個(gè)細胞的多達30多種的形態(tài)表征和運動(dòng)參數，包括面積、厚度、體積、不規則度等。
Figure 4 利用細胞表面粗糙度來(lái)區分不同的細胞狀態(tài) 來(lái)源：Croft, L.V., Mulders, J.A., Richard, D.J., O’Byrne, K. (2019). Digital Holographic Imaging as a Method for Quantitative, Live Cell Imaging of Drug Response to Novel Targeted Cancer Therapies. In: Batra, J., Srinivasan, S. (eds) Theranostics. Methods in Molecular Biology, vol 2054. Humana, New York, NY.
HoloMonitor的相關(guān)應用
· 細胞形態(tài)（多達30種動(dòng)態(tài)參數）
· 深度單細胞追蹤研究
· 細胞遷移，運動(dòng)與單細胞跟蹤
· 細胞劃痕實(shí)驗|細胞趨化
· 細胞增殖
· 細胞生長(cháng)|分裂|周期
· 細胞分化
· 藥物效應
· 細胞毒性|細胞凋亡
· 細胞計數
· 細胞質(zhì)控(QC)
Figure 5 HoloMonitor M4活細胞成像儀的應用
HoloMonitor? M4
· 光源: 外接激光
· 樣品照度: 635 nm, 0.2 mW/cm2
· 物鏡: 20x
· 橫向分辨率: 1 μm
· 視野范圍: 567 μm × 567 μm
· 工作距離: 0.5 – 2 mm
· 自動(dòng)聚焦范圍: 1.5 mm
· 捕獲速度: 1 圖像/s
· 成像大小: 1024 × 1024 pixels
· 載物臺移動(dòng)空間: 100×70×10 (x×y×z)
· 載物臺精確度: 5 μm
· 產(chǎn)品尺寸: 290×200×190 mm (長(cháng)×寬×高)
· 工作空間: 400×270×190 mm (長(cháng)×寬×高)
· 重量: 5.15 kg
電腦要求
· 操作系統: Windows 10, 64–bit
· 處理器: Intel Core i7 (第八代)
· 儲存: 16 GB RAM (最少8 GB)
· 硬盤(pán): 512 GB SSD (最少256 GB)
· 顯卡: Full HD (min 1920×1080)
· 其他: 2 個(gè)USB接口
樣品與工作環(huán)境
· 細胞: 單層真核貼壁細胞
· 培養皿規格: 6-, 24-, 96-well, Petri, IBIDI
· 運行溫度: 10-40° C
· 運行濕度: 最大95 %
